发布时间：2021-06-08 热度：

　　首先，需验证的分析方法类型有以下四种；

　　①鉴别试验

　　②杂质的定量试验

　　③杂质控制的限度试验

　　④原料药或制剂中活性成分以及制剂中选定组分的定量试验。

　　试验类型如下：

　　①鉴别试验旨在确证样品中的一种被测物的特性。通常将样品的性质（如光谱、色谱行为、化学反应性等）与参比对照品的性质进行比对。

　　②杂质检查是指样品中杂质的定量检测或限度检测，两种检测均是为了准确反映样品的纯度。定量试验所需验证项目与限度试验相比是不同的。

　　③含量测定是指测定样品中被分析物的含量。本文件中含量测定是指原料药中主要成分的定量测定。类似的验证项目也适用于制剂中的活性组分或其他指定成分的定量测定，以及与其他分析方法（如溶出度）相关的定量分析。

　　做药物分析的小伙伴都应该清楚了解分析方法的目的，这将决定需要评价哪些验证项目。应进行评价的典型的验证项目如下：专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度（进样精密度、重复性、中间精密度）、准确性。

　　专属性（Specificity）专属性是指可能存在某些组分(如杂质、降解物、基质等)时，对被分析物准确可靠测定的能力。

　　专属性有以下含义：

　　①鉴别：确证被分析物符合其特性。

　　②纯度检查：确保采用的分析方法可检出被分析物中杂质的准确含量，如有关物质、重金属、溶剂残留量等。

　　③含量测定（含量或效价）：提供样品中被分析物的含量或效价的准确结果。

　　定位分离试验

　　①主峰峰纯度的确定

　　在专属性验证的相关实验中，主成分峰都应该考察峰纯度，确认主成分峰为单一成分的峰。具体做法是用DAD检测器进行峰纯度扫描或者用LC-MS确认没有其他成分。

　　②稀释剂

　　应考察稀释剂对被测物的干扰，空白稀释剂出的峰应不干扰被测物。具体做法是按照质量标准规定的进样量进样空白稀释剂，记录色谱图。

　　③辅料

　　取质量标准规定量的供试品中等量的空白辅料，按照规定分析处理，记录色谱图，空白辅料峰应不干扰被测物。

　　④有关物质

　　有关物质分为两大块：工艺杂质和降解杂质。如果在二者均可获得的情况下，将杂质分别定位，并配制一份混合溶液，根据检测内容的不同分别研究。含量测定各杂质峰应不干扰主成分的检测，即各杂质峰应和主成分峰达成基线分离，各杂质峰之间没有要求，重叠也无妨，因为含量测定只需确认主成分峰不受干扰即可。有关物质中各杂质峰和主成分峰之间的分离度均应符合要求，一般不小于1.5。特殊情况可将某些杂质合并控制，如互为对映异构体的非对映异构体，它们在反相色谱法中一般都是重叠的峰。

　　国科质检提醒如降解杂质不可获得，应进行酸碱氧化破坏条件下考察可能的降解杂质的干扰，该实验一般都做，但不是必须做，如果已经对降解杂质有了充分的研究，就无需做破坏实验。例如已经有了有效期内长期稳定性的研究结果，确认了稳定性期间的实际降解杂质。因为有些情况下，破坏实验的结果不是真实可能的降解杂质，这种情况以双氧水进行氧化破坏最为常见，破坏产物杂乱无章，甚至有可能因为该实验推翻分析方法。